范圍本標(biāo)準(zhǔn)
規(guī)定了NASBA快速檢測(cè)H5亞型禽流感病毒技術(shù)規(guī)范的材料準(zhǔn)備、操作方法和結(jié)果判定,適用于禽類、禽肉產(chǎn)品中H5亞型禽流感病毒的快速檢測(cè)、分析。
材料準(zhǔn)備
試驗(yàn)環(huán)境應(yīng)為干凈的環(huán)境,最好分區(qū)分為核酸提取、核酸擴(kuò)增和核酸檢測(cè)三個(gè)區(qū)。
器材
采用常規(guī)的分子生物學(xué)器材,包括:一次性工套、移液器(量程5u L到200 a L)、槍頭、無(wú)RNA酶的1.5mL塑料{卻自管,1.5mL冷卻自管架,5mL試管架、旋渦振蕩器、計(jì)時(shí)器、高速臺(tái)式離心機(jī)、溫度計(jì)(精度士2`C、加熱器、水浴鍋,5mL聚丙烯試管(VW R)、封口膜等。
如果采用ECL方法,需要NucIiSens閱讀器或者等同的儀器。
如果采用ELISA方法,需要酶標(biāo)儀。
結(jié)果判定
通過(guò)大量分析已知陰性對(duì)照樣品后。確定NASBA/ECL的臨界值為0.15
x儀器參照溶液。的數(shù)值樣品的讀數(shù)超過(guò)臨界值時(shí),判為H5亞型離流感病毒一陽(yáng)性,低于臨界值時(shí),判為H5亞型禽流感病毒陰性禽流感病毒NASBA檢測(cè)方法。