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魚血離心轉(zhuǎn)速及溫度控制注意事項

2018/5/16 19:43:30??????點擊:

1、血清:現(xiàn)在的很多文獻都寫的4度下靜置(1到數(shù)小時都可以,甚至有人寫過夜),然后4度下3000或3500 r/min,10或15min.見過最少的寫1500 r/min,最多的寫5000r/min.但這只是寫……實際情況未必是這樣.


先說靜置,4度下靜置要好久才析出一點血清,很不實惠.其實室溫下放1、2個小時,大部分酶都不會失活,而且出血清很快.一些經(jīng)典老教材上甚至寫著,冬天室溫低,可以在37度水浴中放置到血清析出.所以我覺得,4度下靜置有點多此一舉.


再說靜置后的離心,如果您用的是玻璃離心管或者放免管(內(nèi)壁一定要干凈),那么按照文獻中的轉(zhuǎn)速和時間離心可以.但是現(xiàn)在大多數(shù)時候都用塑料離心管,如果還用3000—4000的轉(zhuǎn)速,所得血清經(jīng)常會出現(xiàn)果凍狀的東西,常溫化不開,不能用了.所以,如果用塑料管離心,建議慢一些,4度下1500、1000都可以,離30—60min,可有效避免上述情況.


2、血漿:采的時候加抗凝劑.現(xiàn)在的文獻上也寫的是3000、3500、4000離心10或15分鐘.當然這個不需要靜置.其實血漿就是把抗凝血里面的血細胞沉降出來就行了,您可以用2000或2500離心15分鐘看看,效果是一樣的.


3、全血:當然不需要離心了……


另:1、以上說法只能針對魚,別的動物我不懂.2、只針對血液生理生化指標,做基因的我也不懂……3、做是做,寫是寫.您寫文章的時候還是得按文獻來.

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