一：實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1. 抗原：根據(jù)指定免疫類型從生物公司購(gòu)買穩(wěn)定的濃縮抗原
2. 抗凝劑的配制：用分析天平稱取3.8克檸檬酸三鈉，溶解于100毫升生理鹽水中，待溶解完全后即可使用。
3. 1%紅細(xì)胞懸液制作：去菜市場(chǎng)找殺雞的，去找他們用試管接新鮮雞血，試管中提前加入抗凝劑，加入的抗凝劑與你所接血液的比例大概為1:2，并迅速混勻，在離心機(jī)中以3000轉(zhuǎn)離心五分鐘，用吸管吸取上清液和紅細(xì)胞上層的白細(xì)胞薄膜，將沉淀的紅細(xì)胞加生理鹽水，慢慢混合均勻，不要弄碎了紅細(xì)胞，再在離心機(jī)中3000轉(zhuǎn)離心五分鐘，棄去上清，再加生理鹽水混勻，如此往復(fù)四到五次。最后一次離心后，去掉上清，管低即為紅細(xì)胞泥，用吸管吸取0.1毫升紅細(xì)胞泥，然后加入9.9毫升的生理鹽水就是1%的紅細(xì)胞懸液，現(xiàn)用現(xiàn)配不要長(zhǎng)時(shí)間存放。
4. 被檢血清：鄉(xiāng)鎮(zhèn)送來(lái)的血液，離心取上清即為被檢驗(yàn)血清，注意做標(biāo)記，一管一標(biāo)記，別弄混了。
5. 血清稀釋液：為滅菌生理鹽水，即高壓過(guò)的生理鹽水
二：實(shí)驗(yàn)步驟
血凝（HA）實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菧y(cè)定抗原效價(jià)，即為了制作后面的四單位抗原
1.首先用微量移液器向96孔V型板的每一孔加生理鹽水25微升
2.用微量移液器吸取待測(cè)抗原（就是你買的抗原）的25微升于第一孔中并且擠壓六次混合，后吸出25微升至第二孔，依次倍比稀釋到第11孔，11孔中棄去25微升。這一過(guò)程最好一孔一換針頭。
3.用微量移液器再吸取1%紅細(xì)胞懸液一次加入各孔，每孔25微升
4.置于微量振蕩器上震蕩一分鐘
5.室溫靜置30分鐘觀察結(jié)果
6. 結(jié)果觀察：
將反應(yīng)板傾斜成45度角，沉于底的紅細(xì)胞沿著傾斜面向下呈線狀流動(dòng)者為沉淀，表明紅細(xì)胞被或者不完全被病毒所凝集：
如果孔底的紅細(xì)胞鋪平孔底，凝集成均勻薄層，說(shuō)明被病毒凝集。
能使雞紅細(xì)胞完全凝集的抗原最高稀釋濃度，成為該抗原滴度紅細(xì)胞凝集效價(jià)，即這個(gè)比例稀釋的抗原就是一單位的抗原。比如第八孔紅細(xì)胞完全凝集，但第九孔紅細(xì)胞不凝集，那么這個(gè)抗原的效價(jià)為1:256。
也就是你買來(lái)的抗原稀釋256倍為一單位抗原，那么稀釋64倍就是四單位抗原。
四單位抗原校正：
1. 就是你依照上個(gè)實(shí)驗(yàn)所作出的抗原效價(jià)來(lái)配置，比如假設(shè)上一步抗原效價(jià)為1:256，那么四單位抗原就是256除以4為64倍稀釋濃度的抗原，也就是你將買來(lái)的抗原稀釋64倍就是四單位的抗原，但是你買的抗原不同，雞紅細(xì)胞的本身原因，計(jì)算出的抗原效價(jià)不同，所以你必須先做抗原效價(jià)的計(jì)算。
2. 首先用微量移液器向反應(yīng)板的第二孔至第六孔加生理鹽水25微升，第一孔不加。
3. 用微量移液器吸取四單位抗原25微升分別加入第一孔，第二孔，從第二孔開(kāi)始擠壓六次混勻，后從第二孔吸出25微升至第3孔，依次倍比稀釋到第五孔，棄去25微升。
4. 用微量移液器再吸取1%紅細(xì)胞懸液依次加入1到6孔，每孔25微升。
5. 在微量振蕩器上震蕩一分鐘。
6. 室溫靜置30分鐘觀察結(jié)果
7. 如果照上面的結(jié)果來(lái)計(jì)算，如果第四孔發(fā)生百分之五十紅細(xì)胞沉淀而第五孔完全凝集，那么久說(shuō)明四單位抗原制作準(zhǔn)確。
血凝抑制實(shí)驗(yàn)（HI）：每排只能查一份血清，步驟如下
1. 用微量移液器先加25微升生理鹽水在每個(gè)孔中
2. 用微量移液器吸取待檢測(cè)血清25微升于第一孔中，然后倍比稀釋至第11孔，（就是稀釋原則跟上面的一樣），最后11孔棄去25微升，最后第12孔不加血清，作為對(duì)照試驗(yàn)。
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